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高精度NTC熱敏電阻在核酸檢測(cè)中的重要作用

科訊視點(diǎn) ? 來源:科訊視點(diǎn) ? 作者:科訊視點(diǎn) ? 2021-12-03 16:20 ? 次閱讀
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自2020年的新冠疫情在全球爆發(fā)以來,至今仍然持續(xù)高位流行。為了控制新冠疫情擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn),全面落實(shí)常態(tài)化疫情防控策略,持續(xù)的大規(guī)模核酸檢測(cè)是非常必要的。為了提高核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確性,使用高精度NTC熱敏電阻作為PID溫度控制模塊的傳感器,可以為PID溫度控制模塊提供優(yōu)異的實(shí)時(shí)測(cè)溫值,從而保證PID溫控器可以精確地實(shí)現(xiàn)控溫。南京時(shí)恒電子科技有限公司生產(chǎn)的高精度NTC熱敏電阻最高測(cè)量精度可達(dá)±0.01℃,測(cè)溫精確,靈敏度高,大大提高了核酸檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,縮短了核酸檢測(cè)時(shí)間,使核酸檢測(cè)更快、更便捷。

核酸是如何檢測(cè)的呢?從生物醫(yī)學(xué)的角度來說,假設(shè)咽拭子檢測(cè)樣本中可能只有1個(gè)病毒,由于數(shù)量過少,光學(xué)熒光檢測(cè)不到,導(dǎo)致新冠檢測(cè)結(jié)果假陰性。因此,需要經(jīng)過DNA/RNA擴(kuò)增(克隆/復(fù)制)后才能進(jìn)行分析和檢測(cè)。目前普遍采用以下兩種擴(kuò)增技術(shù):①聚合酶鏈反應(yīng)(PCR,RT-PCR)、②環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)。例如,通過PCR將這1個(gè)病毒DNA片段擴(kuò)增成數(shù)十億個(gè),然后再做核酸光學(xué)熒光,無(wú)論咽拭子中病毒量如何,只要有病毒就能被檢測(cè)出來,因此核酸檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性大大增加。

PCR的這三個(gè)關(guān)鍵步驟如下圖所示:

第一步,變性(Denaturing):將溫度升高至94-95℃,連接雙鏈DNA的氫鍵被打開,DNA雙鏈變成兩條單鏈DNA(母鏈);

第二步,退火(Annealing stage):將溫度下降至50-56℃,加入熱穩(wěn)定的DNA聚合酶(Taq)和脫氧核苷三磷酸(dNTPs)。DNA引物(Primer)結(jié)合到已打開的DNA單鏈上目標(biāo)擴(kuò)增序列的特定位置。

第三步,延長(zhǎng)(Elongation):溫度重新升高至72℃,以DNA兩條單鏈作為模板母鏈,DNA引物帶領(lǐng)DNA聚合酶將dNTPs放置在正確的位置上將子鏈DNA延長(zhǎng)。自此,一條雙鏈DNA變成了兩條雙鏈DNA。

重復(fù)此循環(huán)過程,很快可產(chǎn)生數(shù)十億個(gè)DNA拷貝。在PCR的這三步中,除了加入正確的primer,最為重要的成功因素就是調(diào)控準(zhǔn)確的溫度。

來源: https://www.yourgenome.org/facts/what-is-pcr-polymerase-chain-reaction

LAMP(環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增)是一種等溫核酸擴(kuò)增技術(shù)。與PCR需要循環(huán)三個(gè)不同的溫度相比,LAMP擴(kuò)增是在恒定溫度下進(jìn)行的(60–65 °C)。 LAMP的優(yōu)勢(shì)在于操作簡(jiǎn)單和低成本,但是如果溫度控制不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)錯(cuò)誤,因?yàn)椴煌奈镔|(zhì)、不同的溫度會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的產(chǎn)生。

不管是PCR和LAMP擴(kuò)增技術(shù),都需要對(duì)加熱/冷卻的元件進(jìn)行精確的溫度控制。相比于其他類型的溫度傳感器,NTC熱敏電阻制做的高精度溫度傳感器具有更高的電阻溫度系數(shù)和更小的體積,所以其具有更高的測(cè)溫精度和靈敏度。

目前,最新研發(fā)的恒溫核酸擴(kuò)增檢測(cè)分析儀、新冠病毒核酸檢測(cè)試劑盒(恒溫CRISPR法)成為國(guó)內(nèi)最快的新冠核酸檢測(cè)自動(dòng)化設(shè)備。CRISPR是一種基因編輯技術(shù)工具,具有廣闊的應(yīng)用前景,在核酸檢測(cè)中也可以應(yīng)用。將核酸靶標(biāo)加入CRISPR/Cas反應(yīng)體系,活性蛋白Cas的剪切活性會(huì)被激活,從而剪切反應(yīng)體系中帶有熒光基團(tuán)的引物探針,如果樣本呈陽(yáng)性,就會(huì)因Cas蛋白剪切發(fā)出熒光。這款儀器的核酸擴(kuò)增環(huán)節(jié)需要保持42攝氏度,所以需要高精度NTC熱敏電阻制作的溫度傳感器來進(jìn)行精確控溫。

南京時(shí)恒電子科技有限公司生產(chǎn)的用于核酸檢測(cè)的高精度NTC熱敏電阻,測(cè)量溫度精度達(dá)到±0.05℃、最高精度可達(dá)±0.01℃;并且可以實(shí)現(xiàn)寬溫度區(qū)間的高精度;其電阻溫度系數(shù)達(dá)到-4%~-5%;具有高靈敏度、高精確度、高穩(wěn)定性、高可靠性、高互換性等特點(diǎn),在核酸檢測(cè)中可以發(fā)揮重要的作用!

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