近日，湖南大學(xué)蔡仁/南華大學(xué)楊紅芬基于CRISPR/Cas12a交叉切割技術(shù)和高效納米酶，制造了一種智能手機(jī)介導(dǎo)的自供電生物傳感器，用于檢測(cè)miRNA-141。AuPtPd@GDY納米酶作為一種新型納米酶和信號(hào)放大協(xié)同作用加速器，表現(xiàn)出催化級(jí)聯(lián)顯色反應(yīng)的優(yōu)異能力和高電導(dǎo)率，以增強(qiáng)miRNA-141測(cè)定的電化學(xué)信號(hào)。在CRISPR/Cas12a橫切S2葡萄糖氧化酶（S2-GOD）后，電化學(xué)信號(hào)減弱，通過(guò)監(jiān)測(cè)信號(hào)的減少來(lái)檢測(cè)miRNA-141。相關(guān)工作以“A Smartphone-Mediated “All-In-One” Biosensing Chip for Visual and Value-Assisted Detection”為題發(fā)表在國(guó)際著名期刊Analytical Chemistry上。

研究要點(diǎn)

要點(diǎn)1. 作者報(bào)告了一種基于CRISPR/Cas12a交叉切割技術(shù)和高效納米酶的新型自供電生物傳感器，用于視覺(jué)和價(jià)值輔助檢測(cè)miRNA-141。

要點(diǎn)2. 發(fā)夾H2順序地使miRNA-141和ExoIII（即核酸外切酶）雜交，形成ExoIII-H2-miRNA-141，這是一種環(huán)狀結(jié)構(gòu)，經(jīng)ExoIII特異性切割后釋放出miRNA-141，H2仍呈發(fā)夾環(huán)形式。釋放的miRNA-141進(jìn)一步參與下一個(gè)循環(huán)過(guò)程。當(dāng)Cas12a/crRNA復(fù)合物（一種DNA切割酶）被添加到陽(yáng)極室中時(shí)，形成Cas12a/crRNA/H2二倍體結(jié)構(gòu)，激活Cas12a的核酸酶切割活性，以非特異性消化S2葡萄糖氧化酶（S2-GOD，即單鏈核苷酸）。S2-GOD完全降解后，生物傳感器的電化學(xué)信號(hào)減弱，在此過(guò)程中檢測(cè)到miRNA-141。

要點(diǎn)3. 自供電生物傳感器能夠?qū)崿F(xiàn)miRNA-141的數(shù)值輔助和視覺(jué)檢測(cè)，檢測(cè)限分別為3.1和15 aM?；陔p模自供電傳感系統(tǒng)，設(shè)計(jì)了一種智能手機(jī)介導(dǎo)的“一體式”生物傳感芯片，實(shí)現(xiàn)了對(duì)miRNA-141的實(shí)時(shí)智能監(jiān)測(cè)。

這項(xiàng)工作為設(shè)計(jì)多功能生物傳感器提供了一種新方法，以實(shí)現(xiàn)腫瘤生物標(biāo)志物的可視化和便攜式檢測(cè)。

研究圖文

圖1. AuPtPd@GDY的表征。

圖2. 電極修飾過(guò)程。

圖3.（a）AuPtPd@GDY納米酶機(jī)制示意圖.（b）不同反應(yīng)體系的紫外-可見(jiàn)光譜。（c）催化反應(yīng)體系中·OH的EPR譜。催化過(guò)程中的（d）自由能圖和（e）狀態(tài)密度。

圖4.（a）在電化學(xué)模式下，存在不同濃度的miRNA-141的自供電生物傳感器的Eocv。（b）Eocv和miRNA-141濃度之間的關(guān)系（插圖：校準(zhǔn)圖）。（c）在比色模式下，在不同濃度的miRNA-141存在下，自供電生物傳感器的紫外-可見(jiàn)吸收率。（d）紫外吸光度（652 nm處）和miRNA-141濃度之間的關(guān)系（插圖，反應(yīng)溶液顏色變化的照片圖像）。

文獻(xiàn)詳情

A Smartphone-Mediated “All-In-One” Biosensing Chip for Visual and Value-Assisted Detection

Jing Xu, Yujin Li, Futing Wang, Hongfen Yang,* Ke-Jing Huang, Ren Cai,* Weihong Tan

Anal. Chem.

DOI: https://doi.org/10.1021/acs.analchem.4c03854

來(lái)源：崛步化學(xué)

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