原生質(zhì)體培養(yǎng)（4學時）
教學目的與要求：
深入了解植物細胞結(jié)構(gòu)功能與細胞全能性表達的關(guān)系，掌握原生質(zhì)體的分離以及培養(yǎng)過
程中滲透壓和激素的調(diào)控原理與技術(shù)。
第一節(jié)、原生質(zhì)體研究概況
一、原生質(zhì)體的概念
? 原生質(zhì)體(protoplast)：指除去細胞壁的細胞或是說一個被質(zhì)膜所包圍的裸露細胞。
? 亞原生質(zhì)體(subprotoplast)：在原生質(zhì)體分離過程中，有時會引起細胞內(nèi)含物的斷裂而形
成一些較小的原生質(zhì)體就叫做亞原生質(zhì)體。它可以具有細胞核或沒有細胞核。
? 核質(zhì)體(nuclearplast)：由原生質(zhì)膜和薄層細胞質(zhì)包圍細胞核形成的小原生質(zhì)體。也稱為
微小原生質(zhì)體(miniprotoplast)。
? 胞質(zhì)體（cytoplast）：不含細胞核而僅含有部分細胞質(zhì)的原生質(zhì)體。
二、原生質(zhì)體研究進展
植物原生質(zhì)體培養(yǎng)研究中幾個值得提出重要成就：
? 1880年，Hanstein首次起用原生質(zhì)體(protoplast)一詞。
? 1960年，Cocking首次應(yīng)用酶法制備番茄根原生質(zhì)體獲得成功。
? 1971年，Takebe et al.首次得到煙草葉肉原生質(zhì)體培養(yǎng)的再生植株。
? 1985年，F(xiàn)ujimura et al.第一例禾谷類作物－水稻原生質(zhì)體培養(yǎng)再生植株。
? 1986年，Spangenberg et al.單個原生質(zhì)體培養(yǎng)再生植株在甘藍型油菜上獲得成功。
據(jù)統(tǒng)計，目前已有49個科，146個屬的320多種植物經(jīng)原生質(zhì)體培養(yǎng)得到了再生植株
（1993）。其趨勢仍以農(nóng)作物和經(jīng)濟作物為主，但從一年生向多年生、草本向木本、高等植
物向低等植物擴展。
三、原生質(zhì)體研究的意義
第二節(jié)、原生質(zhì)體的制備
1、用于分離原生質(zhì)體的材料準備
? 無菌試管苗葉片
? 上胚軸和子葉
? 培養(yǎng)細胞